茂名液相色谱柱-联方广东总代理-液相色谱柱批发

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液相色谱柱的使用方法

关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。gao效液相色谱柱的正确使用包含：加装保护柱，过滤流动相和样品，净化样品，避免过高的柱压，注意温度和酸碱度，正确及时的冲洗等。

1.加装保护柱

保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器，但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染，因此，加装保护柱是---的，---是在分析中药、zhong成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。

保护柱填料应与分析柱一致，粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品，经过一定次数的样品分析(50～100次)后，出现柱压---升高或峰形变坏或基线漂移时，应考虑更换保护柱。

2.过滤流动相和样品

流动相通常由水或缓冲溶液与有ji溶剂混合而成，原则上，所有经过色谱柱的流动相均应过滤，但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有ji溶剂用色谱纯级，水用石英亚沸水或其它超纯水时，在能---水和有ji溶剂的且没有受到污染时，过滤并无更多实际意义。

当流动相中含有缓冲盐时，则过滤是---的，如前所述，当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异，夏季一般不超过48 h，冬季一般不超过一周)后，在使用前还应重新过滤。

所配制的样品试液在注入流路系统前均要经0. 45μm ( 0. 22μm则---)孔径滤膜过滤。要注意区分水系和油系，二者不可混用，以防止滤膜溶解而造成污染。

装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换，以避免滤器因过载而起不到过滤作用。

3.净化样品

当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分，如产生yong久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质，以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。

4.避免过高柱压

虽然gao效液相色谱柱---受的压力可达6000 p si (磅/平方英寸) ，但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命，避免的方法是

(1)柱压过高时，尽可能采用较小的流速，以不超过柱z大允许压力的一半为宜。

( 2)当流速较大时，应采取流速梯度的办法使流速分步---。

(3)使用手动进样阀时，进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时，柱切换要避免在高压下进行。

5.注意温度和酸碱度

一般以硅胶为基质的色谱柱z高使用温度不超过60℃，以低于40℃为宜，---是在流动相ph接近使用限度时，更应降低使用温度。

温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解，从而使填料性质改变，柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。

正确及时的冲洗

开始试验前，应了解柱中当前是何种溶剂。对于新色谱柱，如无特殊说明均为评价报告中所用流动相。柱中当前溶剂一定要与分析样品所用流动相互溶，如不能混溶，要用与二者均能相互混溶的第三种溶剂过渡。

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如何避免液相色谱柱的损坏呢？

在gao效液相色谱的使用中，我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。

曾经也有很多同学和我联系讨论色谱柱的清洗和再生，所以我之前写了一篇关于色谱柱的清洗欠你们的色谱柱清洗再生方法来了）。

但是转念一想，其实应该帮助大家做的事情是如何去避免色谱柱的损坏。所以，这次我们就来讨论一下色谱柱的预防吧。

损坏的来源

首先，需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面：

泵头密封圈的磨损

进样阀转子密封圈的磨损

析出的缓冲盐

样品中的复杂易吸附基质

其实，在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。

而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。

但是这种情况在较低的ph系统中会有所---，因为较低的ph系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。

预防措施

为了降低色谱柱的损伤问题，我建议大家在使用色谱柱时可以做一些预防。例如：

1在液相系统中加入在线过滤器

在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米，对于uhplc会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。

不同公司的在线过滤器

所以，在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物，以防止柱头过滤筛板的堵塞。

注意：但是对于非常低死体积的液相系统，在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变---的问题。而对于大多数的液相系统而言，色谱图不会有太大变化。

luxamp 手性液相色谱柱

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